*: معنی دار در سطح ۰۵/۰ (P value=0.05)
۳-۵- نتایج اثر زمان های مختلف انکوباسیون(۳،۲،۱،۰ساعت) بعد از آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up برروی قطعه قطعه شدن DNA اسپرم
بلافصله بعد از آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up (زمان صفر) درصد میانگین قطعه قطعه شدن DNA اسپرم ۸۰۹/۰±۳۸/۴، یک ساعت بعد از انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد ۸۹۰/۰±۱۴/۶، دو ساعت بعد از انکوباسیون ۹۳۵/۰±۸۱/۸ و سه ساعت بعد از انکوباسیون ۸۹۴/۰±۷۶/۱۰ گزارش شد.
میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم بعد از آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up (زمان صفر) نسبت به پس از یک ساعت انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد بطور معنی دار افزایش نیافته بود(۴۹۷/۰P < ) اما پس از دو ساعت و همچنین سه ساعت انکوباسیون اسپرم در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد نسبت به زمان صفر میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم اختلاف معنی داری پیدا کرد (۰۰۴/۰P < ، ۰۰۰۱/۰P < ).
درصد میانگین قطعه قطعه شدن DNA اسپرم پس یک ساعت انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد نسبت به دو ساعت انکوباسیون اختلاف معنا داری را نشان نداد (۱۵۱/۰P < ).
اختلاف درصد میانگین قطعه قطعه شدن DNA اسپرم پس سه ساعت انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد نسبت به یک ساعت انکوباسیون بطور معنی دار افزایش یافته بود (۰۰۲/۰P < ).
سه ساعت پس از انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم نسبت به دو ساعت انکوباسیون اختلاف معنی داری را نشان نداد (۴۰۵/۰P < ).
نمودار۳-۴: مقایسه میانگین قطعه قطعه شدن DNA اسپرم در زمان های مختلف انکوباسیون بعد از آماده سازی به روش Swim-up
DNA fragmentation %
۳-۳- تست SCD برای بررسی میزان قطعه قطعه شدن DNA اسپرم میباشد: :A اسپرم داری هاله ی بزرگ در اطراف سر خود می باشد ، یعنی DNA اسپرم سالم است.B : اسپرمی که هاله ندارد بدین معنی که DNA آن قطعه قطعه شده است.C : اسپرم دارای هاله متوسط داری قطعه قطعه شدن DNA می باشد. هرچه هاله ی ایجاد شده در اطراف سر اسپرم بزرگتر باشد DNA سالم تر است.

۳-۶- نتایج اثر زمان های مختلف انکوباسیون(۳،۲،۱،۰ساعت) بعد از آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up برروی آپوپتوز اسپرم
بلافصله بعد از آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up (زمان صفر) درصد میانگین آپوپتوز اسپرم ۹۳۳/۰±۹۰/۴، یک ساعت بعد از انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد ۰۵/۱±۱۰/۷، دو ساعت بعد از انکوباسیون ۸۶۴/۰±۱۹/۹ و سه ساعت بعد از انکوباسیون ۷۸۸/۰±۹۵/۱۰ گزارش شد.
میزان آپوپتوز اسپرم بعد از آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up در زمان صفر نسبت به پس از یک ساعت انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد بطور معنی دار افزایش نیافته بود(۳۳۵/۰P < ) اما پس از دو ساعت و همچنین سه ساعت انکوباسیون اسپرم در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد نسبت به زمان صفر میزان آپوپتوز اسپرم اختلاف معنی داری پیدا کرد (۰۰۸/۰P < ، ۰۰۰۱/۰P < ).
درصد میانگین آپوپتوز اسپرم پس یک ساعت انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد نسبت به دو ساعت انکوباسیون اختلاف معنا داری را نشان نداد(۳۷۵/۰P < ).
اختلاف درصد میانگین آپوپتوز اسپرم پس سه ساعت انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد نسبت به یک ساعت انکوباسیون بطور معنی دار افزایش یافته بود (۰۲۰/۰P < ).
سه ساعت پس از انکوباسیون در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد میزان آپوپتوز اسپرم نسبت به دو ساعت انکوباسیون اختلاف معنی داری را نشان نداد (۵۲۸/۰P < ).
نمودار۳-۵: مقایسه میانگین آپوپتوز اسپرم در زمان های مختلف انکوباسیون بعد از آماده سازی به روش Swim-up
Apoptosis %
B
A
۳
۳
۳-۴-رنگ آمیزی TUNEL: A: سلولهای بدون رنگ و قهوه ای کم رنگ بدون شکستگی DNA می باشد و TUNEL-در نظر گرفته شد.B : سلولهای با رنگ قهوه ای تیره دارای شکستگی DNA می باشد و TUNEL+در نظر گرفته شد.
جدول۳-۲-مقایسه میانگین اثر زمان های مختلف انکوباسیون(۳،۲،۱،۰ساعت) بعد از آماده سازی اسپرم به روش Direct Swim-up برروی قطعه قطعه شدن DNA آپوپتوز اسپرم

شاخص ها
متغیر ها

میانگین

زمان صفر

یک ساعت

دو ساعت

سه ساعت

قطعه قطعه شدن DNA
%

۸۰۹/۰±۳۸/۴

۸۹۰/۰±۱۴/۶

۹۳۵/۰±۸۱/۸

۸۹۴/۰±۷۶/۱۰

آپوپتوز
%

۹۳۳/۰±۹۰/۴

۰۵/۱±۱۰/۷

۸۶۴/۰±۱۹/۹

۷۸۸/۰±۹۵/۱۰